液相色谱的基本原理
液相色谱基本原理是分离度(也叫分辨率)正比于
四分之理论塔板数n的平方根乘以
选择因子a比上a-1再乘以
分离因子k+1比上k
我认为分离度和这些变量是正比关系而不是准确的等于,如果非要说是等于的关系,离子柱采购,再加上一个常数可能会更合理。
n和柱长(正比)、粒径(反比)、固定项填料(全多孔硅胶型,表面多孔/核壳型)有关
a和流动相种类(反向色谱:和)、pH(2到9)、柱温有关
分离因子/保留因子(平衡状态下,固定相中含量与流动相中的比值)和流动相种类、流动相比例、柱温、固定相填料有关
为什么液相色谱适合分析低沸点化学物质?
这个说法不能理解成液相色谱不适合分析高沸点物质。
其实这是因为气相色谱一般需要对物质进行加热,然后根据汽化温度(沸点)不同,物质先后进入检测器。检测器一般是氢火焰检测器为主。
如果一个物质沸点太低,那么很容易出峰非常快,和溶剂出在一起,在谱图前端,根本看不出来(如果你看过气相色谱图你就知道了)。
此时就需要用HPLC,昭和离子柱采购,因为HPLC分开物质依据的是物质和色谱柱填料的亲和力强弱,而不是沸点。
举个例子,如果我想要知道我一个样本中是否含有(沸点85℃),用气相色谱是非常困难的。因为沸点100℃以下的物质在GC里面出峰是极度困难的。
但是我如果用HPLC配合反相柱,此时就可以看得出来。
多说一点,昭和离子柱采购,实际上还有一些情况我不能用HPLC来分析,就是当一个化合物极性非常大或者极性非常小,昭和离子柱采购,此时我无论用正相色谱柱还是反相色谱柱,都会有一个问题,就是我的化合物要么出在前面和溶剂在一起,要么根本出不出来。
比如咪唑,咪唑的亲水性太强,我经常在HPLC反相柱里面分离不开,此时一般我要分析,就会借助GC(沸点256℃)
液相色谱
GC与LC的比较
由于HPLC分析不受温度和样品沸点限制,因此具有更广阔的应用潜力。经过30多年的迅速发展,液相色谱法在基础理论、仪器装置和色谱柱等方面的研究已趋于成熟,现已成为化学化工、环境、药学、食品等多个领域中具优势的分离分析方法之一。
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