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饮用水源水中"两虫"检测方法及其健康风险评价研究

贾第鞭毛虫和隐孢子虫(简称"两虫")是两类人兽公患的肠道寄生原虫，通常呈现水源性暴发，受到国际上的广泛关注.目前"两虫"检测方法常用步骤为过滤，分离纯化，染色，镜检.其中过滤存在工作量大，成本较高，回收率不稳定等缺陷.本研究在简单易行的沉淀法基础上，建立了碳酸钙沉淀—密度梯度离心纯化的"两虫"检测方法.通过对某市开放式河网自来水厂的原水"两虫"的调查及检测，研究其健康风险.主要研究成果如下: (1)碳酸钙沉淀法能够有效地浓缩富集饮用水源水中"两虫".采用法分别对沉淀后的上清液和沉淀中的"两虫"数量进行了检测分析.在pH=10，投加碳酸氢钠，氯化钙反应1h并静置12h的条件下，上清液中贾第鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊的平均检出率分别为1.2%，1.1%，"两虫"富集效率可达到98%以上. (2)在碳酸钙沉淀法基础上，对比研究了Percoll-蔗糖密度梯度离心及磁珠法的分离纯化效率，两者对于贾第鞭毛虫孢囊的平均回收率分别为72.3%和59.1%，而对于隐孢子虫卵囊的平均回收率分别为39.5%和52.2%，均满足美国环保局EPA的规定范围;Percoll-蔗糖密度梯度离心法对于贾第鞭毛虫孢囊具有更好的分离效率，而且其分析成本更低. (3)针对某市开放式河网的原水采样调查，采用碳酸钙沉淀/Percoll-蔗糖密度梯度离心的分析方法检测，发现10L水源水中有0-4个贾第鞭毛虫孢囊和0-13个隐孢子虫卵囊.通过剂量-效应指数模型对隐孢子虫潜在风险进行评价可知，两虫染色试剂销售，常规处理和深度处理后出厂水中隐孢子虫的风险值分别为3.71×10-6和3.71×10-8，远低于美国所接收的高风险限值10-4，两虫染色试剂专卖，这表明在现有饮用水源水水质和处理工艺条件下，出水安全可以得到保障.

两虫”的防控

水是人之生存根本。从饮用水的安全角度出发，杭州两虫染色试剂，应重视两虫对人体健康的危害，加强从到用水点的全流程控制和去除灭活，限度降低“两虫”危害。

饮用水处理中使用的常规氯消毒剂不能有效地灭活两虫，去除或灭活两虫的物理方法中，两虫染色试剂厂家，反渗透法、膜过滤法、冻融法等成本较高，不适合大规模应用。紫外线法能较有效地灭活两虫，但紫外线穿透力弱，不利于灭活较深水层处的两虫。在化学法中，臭氧氧化法对两虫的灭活效果。采用多种消毒剂联合使用，通过协同作用，可达到较高的灭活率。

两虫检测方法：

滤膜浓缩/密度梯度分离荧光法

范围：

生活饮用水和水源水中贾第鞭毛虫、隐孢子虫的测定。

原理：

首先通过微孔滤膜法过滤水样浓缩样品或加入氯化钙溶液和碳酸氢钠溶液形成碳酸钙沉淀浓缩样品，将浓缩后的样品通过密度梯度离心进行分离纯化，然后将纯化后的样品经荧光染色，通过荧光显微镜对贾第鞭毛虫孢囊、隐孢子虫卵囊进行定性分析和定量检测；具有高藻、高有机质和高絮凝剂含量的水源水样本应行前期处理。

两虫检测自动识别系统在卫生疾控、供水系统、第三方检测、环境监测等领域具有广阔应用前景，能够为我国从到供水安全保障中两虫防控提供支持，解决我国饮用水两虫检测过程中检测成本高、人工识别存在主观性、设备及耗材依赖进口等诸多问题。