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武汉科锐诺生物科技有限公司

金牌会员3
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企业等级:金牌会员
经营模式:商业服务
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公司官网:www.whkrn.com
企业地址:湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼
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武汉科锐诺生物科技有限公司科研服务实力强,拥有电镜平台、病理平台、分生平台、生化平台、组化荧光等研发平台。可以为探索生命奥秘的科学家提供技术支持和技术服务。公司聚集了100人的科研**,全部为本科以上学历,平台负责人均来自于华中科技大学、武汉大学、华中农业大学、同济协和**等名校,拥有丰富的科研实验......

武汉科锐诺生物(查看)-RNA原位杂交检测技术服务

产品编号:100106484944                    更新时间:2024-12-12
价格: 来电议定
武汉科锐诺生物科技有限公司

武汉科锐诺生物科技有限公司

  • 主营业务:外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务
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  • 公司地址:湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼

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王经理 18627856353

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产品详情






意义

在研究DNA分子原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,RNA原位杂交检测技术服务,应用带有标记的(有性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、等非性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的 mRNA或DNA 的存在并定位;用原位杂交技术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性,可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。







原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交,从而对特定核酸顺序进行精1确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。

原位杂交的特点是杂交在显微镜载玻片上中期染色体标本上进行。所谓原位即指标本上DNA原位变性,在利用放1射性或非放1射性标记的已知核酸探针杂交后,通过放1射自显影或非放1射性检测体系来检测染色体上特异DNA或RNA顺序,可用放1射性颗粒在某条染色体的区带出现的频率或荧光的强弱来确定探针的位置,从而进行准确的基因定位。


将少数菌落转移到纤维素滤膜上

(1) 在含有选择性的琼脂平板上放一张纤维素滤膜。

(2) 用无菌牙签将各个菌落先转移至滤膜上,再转移至含有选择性但未放滤膜的琼脂主平板上。应按一定的格子进行划线接种(或打点)。每菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。后,在滤膜和主平板上同时划一个含有非重组质粒的菌落。

(3) 倒置平板,于37℃培养至划线的细菌菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。

(4) 用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂,在3个以上的不对称位置作标记。在主平板大致相同的位置上也作上标记。

(5) 用Parafilm膜封好主平板,倒置贮放于4℃,直至获得杂交反应的结果。

(6) 裂解细菌,按本段下面所述方法,使释放的DNA结合于纤维素滤膜。



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