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武汉贝科新肽科技有限公司

金牌会员3
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企业地址:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号
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武汉贝科新肽科技有限公司前身为武汉思特进科技发展有限公司,武汉贝科新肽科技有限公司,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接、中药草种植研发为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、中药草种植基地、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;......

贝科新肽科技公司-染色体原位杂交

产品编号:100106833470                    更新时间:2024-12-17
价格: 来电议定
武汉贝科新肽科技有限公司

武汉贝科新肽科技有限公司

  • 主营业务:原位杂交,亚细胞**,蛋白互作,启动子筛选
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  • 公司地址:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号

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产品详情







这一原理对于检测一个特异的mRNA在某一种生物体,或者某些组织切片、单个细胞里具体表达位置非常有用。该技术早应用于60年代末期,由于核酸分子杂交的特异性高,并可定位,因此该技术已被广泛应用,例如与细胞内RNA进行杂交以观察该组织细胞中特定基因表达水平。原位杂交能在成分复杂的组织中进行单一细胞的研究而不受同一组织中其他成分的影响,因此对于那些细胞数量少且散在于其他组织中的细胞内DNA或RNA研究更为方便;同时由于原位杂交不需要从组织中提取核酸,对于组织中含量极低的靶序列有极高的敏感性,并可完整地保持组织与细胞的形态,染色体原位杂交,更能准确地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。




预杂交

1)每个管中置换成大约300ulHYB-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。

2)用等体积的HYB+取代HYB-。

3)60℃水浴,预杂交4小时以上。

杂交

1)吸去预杂交的HYB+,加上100ul已加入探针的HYB+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..

2)60℃ 温浴过夜。

 注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。




DNA 探针为原位杂交提供较高的灵敏度。与RNA探针相比,DNA探针与靶mRNA 分子的杂交强度较弱,因此在杂交后的洗涤中不应使用甲醛。

探针特异性至关重要。如果已知细胞中mRNA或DNA的确切核苷酸序列,则可据此设计高度的互补探针。如果超过 5% 的碱基对不互补,那么探针只能与靶序列发生轻度杂交。这意味着,探针更容易在洗涤和检测步骤中被洗去,可能无法正确检测。





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