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武汉贝科新肽科技有限公司

金牌会员3
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公司官网:bkxtbio.com.cn
企业地址:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号
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武汉贝科新肽科技有限公司前身为武汉思特进科技发展有限公司,武汉贝科新肽科技有限公司,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接、中药草种植研发为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、中药草种植基地、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台;......

荧光原位杂交-湖北原位杂交-武汉贝科新肽科技公司(查看)

产品编号:100107393477                    更新时间:2024-12-27
价格: 来电议定
武汉贝科新肽科技有限公司

武汉贝科新肽科技有限公司

  • 主营业务:原位杂交,亚细胞**,蛋白互作,启动子筛选
  • 公司官网:bkxtbio.com.cn
  • 公司地址:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号

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夏先生 15002786799

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产品详情







以菌落原位杂交为例:对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落(100-200)进行筛选时,可采用该方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张纤维素滤膜上。经培养一段时间后,对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。

将少数菌落转移到纤维素滤膜上

(1) 在含有选择性的琼脂平板上放一张纤维素滤膜。

(2) 用无菌牙签将各个菌落先转移至滤膜上,再转移至含有选择性但未放滤膜的琼脂主平板上。应按一定的格子进行划线接种(或打点)。每菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。后,在滤膜和主平板上同时划一个含有非重组质粒的菌落。

(3) 倒置平板,于37℃培养至划线的细菌菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。

(4) 用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂,在3个以上的不对称位置作标记。在主平板大致相同的位置上也作上标记。

(5) 用Parafilm膜封好主平板,倒置贮放于4℃,荧光原位杂交,直至获得杂交反应的结果。

(6) 裂解细菌,按本段下面所述方法,使释放的DNA结合于纤维素滤膜。





原位杂交第三天

1)        用1ml含10%热灭清的MABT溶液置换溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT溶液置换,一小时以上,后用1mlMABT溶液置换,25分钟。

2)        用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置五分钟。

3)将胚胎转入十六孔板中,湖北原位杂交,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上锡箔纸以避光,避免摇动,室温下显色。

4)每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5)将显色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗两三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。

6)4C冰箱保存。






植物原位杂交的应用包括:

研究基因表达:通过观察荧光信号的位置和数量,可以确定目标基因在植物组织中的表达模式和位置。

染色体定位:将目标基因与染色体中的特定位置进行比较,染色体原位杂交,可以确定目标基因在染色体中的位置和分布。

基因:通过原位杂交技术,可以确定目标基因的序列和位置,荧光原位杂交技术,为基因提供重要的参考信息。

检测物种或品种特异性:通过原位杂交技术可以检测出不同物种或品种之间基因表达的差异,从而为物种或品种特异性研究提供依据。

遗传育种:通过原位杂交技术可以检测出不同品种之间基因表达的差异,从而为遗传育种提供重要的参考信息。







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