






亚细胞定位培养技术是一种基于植物组织培养的实验技术。科学家首先提取洋葱的亚细胞结构,ISH,如细胞核、线粒体、叶绿体等,然后将其接种到培养基中。在培养过程中,科学家可以使用显微镜观察亚细胞的生长和分裂,并记录它们的行为和相互作用。
通过这种技术,科学家可以研究洋葱中亚细胞的结构和功能,了解它们在洋葱生长和发育中的作用。此外,这种技术还可以用于研究洋葱和其他植物的抗病性和耐旱性等方面的机制。这些研究成果将有助于更好地了解洋葱和其他植物的生物学和营养价值,为植物生物学和农学的研究提供有用的信息。

基因法转化洋葱表皮细胞:
分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉(直径为1 μm),加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液,取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中,边振荡边加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP质粒,逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亚精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2,振荡混匀。基因GDS-80轰击时氦气罐的气压为1 300 psi,取10 μL DNA 包裹好的微粒悬浮液加到基因中央,进行轰击,之后放置25℃避光过夜培养,使用ConfocalLaser激光共聚焦显微镜观察。
原理简介
GFP、RFP等荧光蛋白因其的荧光性质和灵敏性,常作为报告基因研究并分析基因产物在细胞中的定位和相互作用等。将目标蛋白与荧光蛋白的N端或者C端融合,通过瞬时转化技术或稳定遗传转化技术,使得该融合蛋白在受体材料细胞内表达,目标蛋白会牵引荧光蛋白一起定位到目标细胞器,通过显微镜观察荧光蛋白在细胞内显示的位置,确定目标蛋白的位置,从而确定目标蛋白的亚细胞定位情况。

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